Cell,2015,160(6),1246-1260

　　慢病毒介导的sgRNA基因敲除系统，在肺癌细胞中的应用

　　A：利用慢病毒建立Cas9-GFPKPD非小细胞肺癌细胞系，将靶向多个基因的sgRNA慢病毒感染上述细胞系，再将该细胞系注射至Nu/Nu免疫缺陷小鼠皮下，以观察肿瘤细胞的肺转移；B：注射一周后，检测发现与肿瘤细胞生长相关的Nrf2和Pten蛋白的表达量显著降低。

　　腺病毒感染细胞应用（a）图：PAdeasy-GFP在293细胞的表达。（b）图：带GFP的腺病毒感染原代肝细胞48-72h的荧光图像。

　　腺病毒介导的shRNA干扰作用在小鼠肌肉中的应用：

　　在小鼠的两条腿的胫骨前肌分别注射对照腺病毒和装载Baf60c(smarcd3)干扰片段的腺病毒，每天两次，连续两天，5天后取肌肉组织，QPCR检测Baf60c的表达情况，Westernblot检测信号通路蛋白的表达情况，以及组织染色。

a

b

　　图（A）为AAV2/9-CAG-GFP病毒在骨骼肌表达，取样时间为注射后一个月。

　　图（B）为AAV2/8-TBG-GFP病毒在肝脏表达，取样时间为注射后一个月。

AAV在肝脏中的应用

　　本公司AAV病毒包装采用3质粒系统：穿梭重组质粒pAAV-shuttler，辅助质粒AdHelperVector（pAdDeltaF6）和包装质粒pAAV-rep/capVector。