腺病毒相关病毒(adenovirus associated virus，AAV)是一类单链线状DNA缺陷型病毒。其基因组DNA小于5kb，无包膜，外形为裸露的20面体颗粒。AAV不能独立复制，只有在辅助病毒（如腺病毒、单纯疱疹病毒、痘苗病毒）存在时，才能进行复制和溶细胞性感染，否则只能建立溶源性潜伏感染。

　　AAV基因组包含3个启动子P5、P19、P40，基因组中间含有两个开放阅读框（ORF），从左往右依次为Rep基因和Cap基因。启动子P5和P19负责Rep基因的转录，参与Rep78，Rep68，Rep52，Rep40这4个非结构蛋白的合成，这四种蛋白主要负责病毒基因组的复制、转录调控、位点特异性整合等。Cap基因编码3个衣壳蛋白不同剪切体VP1、VP2和VP3，构成AAV的衣壳（VP1、VP2、VP3的比例约为1:1:10），由启动子P40负责转录。

　　重组腺相关病毒载体（AAV）所包含的DNA一般是用外源基因表达元件替换AAV的编码基因，仅保留了病毒复制和包装所需的ITR序列。通过反式补偿Rep基因、Cap基因和辅助病毒功能因子包装产生的携带外源DNA。AAV具有安全性高、免疫原性低、宿主范围广、能介导基因在动物体内长期稳定表达等特点，是一种重要的携带外源基因病毒工具，被广泛用于生命科学研究，是重要的基因治疗载体之一。

　　研究发现AAV具有多种血清型，各种不同血清型的AAV载体的主要区别是衣壳蛋白不同，因此对不同的组织和细胞的转染效率存在差异。AAV病毒包装所用载体没有任何共同区域，避免通过重组而恢复出野生型病毒，宿主细胞免疫反应被降至低，从而允许对具有免疫能力的宿主细胞进行基因传递，重组AAV在理论上也不具有复制的能力。

　　建议客户针对不同组织器官选择相应血清型的AAV病毒。

　　腺相关病毒基因传递的优势

　　1.宿主范围广：AAV可高效感染分化和非分化细胞；

　　2.多种血清型：AAV1，AAV2，AAV5，AAV6，AAV7，AAV8，AAV9和AAV2/BBB等；

　　3.安全性高：ITR序列和rep/cap基因分别由独立的质粒表达；未发现AAV对人体致病，rAAV去除了wtAAV基因组的96%，从而进一步保证了其安全性；

　　4.免疫原性低：AAV2的基因组仅4681个核苷酸，便于用常规的重组DNA技术进行操作，而且进行动物实验时造成的免疫反应小；

　　5.载体多样性：不同的启动子（神经特异性启动子Human Synapsin、CamkIIα和GFAP等）和多种报告基因（EGFP、mCherry、RFP和luciferase等）可供客户选择；

　　6.滴度高：可提供1012V.G/ml及以上滴度的病毒.，高可达1014V.G/ml；

　　荣森基因AAV服务：

　　（a）根据客户需要提供AAV载体相关基因编辑，包括基因重组、sgRNA以及shRNA/miRNA设计和构建（包括多重靶向编辑）等。

　　（b）AAV包装纯化以及滴度和纯度检测，包括以下：

　　基因过表达AAV；

　　靶向敲除基因的sgRNA及CRISPR/Cas9相关AAV；

　　干扰基因表达的shRNA/miRNA相关AAV；

　　病毒生产流程：

　　应用实例

(A)

(B)

　　图（A）为AAV2/9-CAG-GFP病毒在骨骼肌表达，取样时间为注射后一个月。

　　图（B）为AAV2/8-TBG-GFP病毒在肝脏表达，取样时间为注射后一个月。

AAV在肝脏中的应用

　　本公司AAV病毒包装采用3质粒系统：穿梭重组质粒pAAV-shuttler，辅助质粒AdHelperVector（pAdDeltaF6）和包装质粒pAAV-rep/capVector。